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细胞凋亡（细胞凋亡的检测方法有哪些）

提问时间：2022-05-29 11:59:12来源：小樱知识网

凋亡是指细胞为了维持内环境的稳定，在基因控制下自主有序的死亡。细胞凋亡不同于细胞坏死。细胞凋亡不是被动的过程，而是主动的过程。它涉及一系列基因的激活、表达和调控。它不是病理状态下的自伤现象，而是为了更好地适应生存环境而积极争取的死亡过程。

细胞凋亡是一个多基因严格控制的过程。这些基因在物种间非常保守，如Bcl-2家族、Caspase家族、癌基因如C-myc、肿瘤抑制基因P53等。随着分子生物学技术的发展，人们已经知道了多种细胞凋亡过程，但是到目前为止，细胞凋亡过程的确切机制还不完全清楚。细胞凋亡的紊乱可能直接或间接与许多疾病的发生有关，如肿瘤和自身免疫性疾病。有很多因素可以诱导细胞凋亡，如辐射、药物等。

专有技术

磷脂酰丝氨酸(PS)正常情况下位于细胞膜内侧，但在凋亡早期，PS从细胞膜内侧翻转到细胞膜表面，暴露于细胞外环境。Annexin-V是一种Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，分子量为35~36KD，能高亲和力特异性结合PS。

碘化丙锭(PI)是一种双链DNA荧光染料。与PI双链DNA结合后能产生荧光，荧光强度与双链DNA含量成正比。细胞内的DNA经PI染色后，可以用流式细胞仪测定细胞的DNA含量，然后根据DNA含量的分布分析细胞周期和凋亡情况。PI染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，含有双基因组DNA的G2/M期细胞的理论荧光强度为2，进行DNA复制的S期细胞的荧光强度在1-2之间。凋亡细胞的部分基因组DNA片段在染色过程中由于核凝聚和DNA断裂而丢失，因此凋亡细胞在PI染色后呈现明显的弱染色，即荧光强度小于1，在流动检测的荧光模式中出现所谓的亚G1峰，即凋亡细胞峰。

凋亡发生时，细胞的光散射特性因细胞质和染色质的浓缩以及细胞核的破碎而改变，产生凋亡小体。在凋亡早期，细胞散射前向角光的能力显著下降，而散射侧向光的能力上升或保持不变。凋亡后期，前向和侧向光散射信号减弱。因此，可以通过流式细胞仪测量细胞光散射的变化来观察细胞凋亡。