国学经典，永久流传《诗经朗诵全集》
《诗经朗诵全集》带你领略国学经典，永久咏传。...
2023-07-31
在这些描述中，特别强调了“不要高压灭菌”、“不要过度加热”和“煮沸并充分溶解”。那么应该怎么做才能做到彻底灭菌，把对培养基的破坏降到最低呢？
三、煮沸灭菌的实际操作
1.至于煮法，有人提出可以离水煮。但经过反复实验，发现这种煮沸方式有两大弊端:①温度不足以达到杀菌效果；②水煮含琼脂培养基在水浴过程中容易分层。
2.为了有效地煮沸和灭菌培养基，根据我们的实践，我们建议如下操作:
①准备电磁炉和搪瓷缸(不要用铁容器)；
(2)按比例向培养基中加入水，称入搪瓷缸中，用玻璃棒搅拌至完全溶解，无明显团块或颗粒；
③将搪瓷缸放在电磁炉上，大火烧开，期间保持搅拌，避免糊底；当液面完全沸腾时，立即将搪瓷缸从电磁炉中取出，视为沸腾操作；液面下降后，立即放回电磁炉，重复上述步骤；共煮3次。
④将煮好的培养基冷却至所需温度，倒入盘中。
四。预防措施
1.补充水分
在加热煮沸的过程中，培养基中的部分水分会蒸发，导致水分减少，从而影响培养基的质量(如平板强度等。)并导致菌落形态结果的偏差。因此，为了使误差最小化，有必要在煮沸之前向搪瓷罐中加入适量的用于制备培养基的水。经验估计，通常在每罐培养基中加入15-20毫升水。在实践中，需要根据每个实验室的具体情况(容器大小和容量)来添加水
2.溶解
煮沸前必须搅拌所有培养基直至完全溶解。不允许将结块的培养基直接加热煮沸，这样容易导致灭菌不彻底。特别是一些含琼脂的培养基，甚至有些琼脂不能完全溶解，导致倒出来的培养皿上出现明显的糠状琼脂颗粒，或者一些含染料的培养基也可能有染料颗粒，会影响培养基的使用(每种情况见下图)。
正确操作:
错误操作:
平板上出现不完全熔化的琼脂颗粒:
3.活跃的
整个煮的过程一定要不断搅拌，避免见底。
4.防烫伤
液面沸腾后，应及时将搪瓷缸从电磁炉中取出，以免液体沸腾出来，污染培养基或烫伤操作人员。
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